二、問題與展望

　　1．移植部位：通常理想的細胞移植靶點應該選擇在癲癇灶，這樣可以減少細胞移植對于其他器官造成的不良影響。Chu 研究表明，通過靜脈注射移植神經干細胞，干細胞不僅存在于海馬的CA1區、CA3區和下托，而且存在于梨狀皮質(piriform codex)、杏仁核、小腦、丘腦等處，甚至在肺、腎和脾均發現移植的干細胞。雖然未發現由于靜脈注射干細胞引發的并發癥，但靜脈移植干細胞存在的潛在危險不容忽視。

　　大量研究表明海馬是顳葉癲癇的癲癇灶，因此在今后的研究中應選擇海馬為移植靶點。Shetty 通過向海仁酸癲癇模型鼠的海馬不同亞區移植胚胎神經元，最終證明海馬CA3區是移植的最佳靶點，移植的細胞能夠最大限度的抑制苔狀纖維發芽。林志國 等應用海仁酸癲癇鼠模型，將神經干細胞移植到癲癇鼠的患側海馬CA3區，結果發現移植的神經干細胞抑制了癲癇鼠的苔狀纖維發芽，并且移植組大鼠海馬腦電棘波的頻率及幅度均減少。Toshinori等 雖然以海馬為移植靶點，但未說明具體的移植亞區。

　　2．移植效果：干細胞移植的目的是治療癲癇，因此治療效果是衡量干細胞移植成敗的關鍵因素。行為學表現和腦電圖相結合是判斷癲癇治療效果的金標準。癲癇患者的癲癇發作大多發生在睡眠過程中，因此應該集中在夜間通過視頻錄像監測癲癇動物的癲癇發作 。B~saki報道¨ 向“去神經支配癲癇鼠模型”(切去內側枕葉、扣帶回、胼胝體等結構，使海馬失去次要的傳人性神經支配和傳出性神經纖維)的海馬內，移植藍斑神經元(1ocus
ceru]eus，為去甲腎上腺素能神經元，屬抑制性神經元)和海馬神經元。通過注射匹羅卡品誘發癲癇，移植藍斑神經元組無癲癇發作，而移植海馬神經元組癲癇發作持續存在并且發作間期棘波頻率明顯高于未移植的對照組癲癇鼠。B~saki研究提示，向癲癇鼠移植海馬神經元有加重癲癇的可能，干細胞移植同樣也有加重癲癇的可能，因此必須嚴密觀察干細胞移植治療癲癇的療效和副作用。

　　3．移植細胞的整合：理想的細胞移植能夠整合到宿主神經環路中，修復受損的神經系統，應該具有以下特征⋯ ：①移植細胞能夠存活，并且存活細胞的數量達到修復神經環路的標準；② 移植細胞能夠從移植點遷徙到適當的宿主細胞層；③移植細胞能夠發育為移植區域特異性(target region—specific)神經元；④移植細胞能夠發出傳出神經纖維，與宿主神經元建立傳出性突觸聯系(eferent connectivity)；⑤ 移植細胞能夠接受宿主神經元發出的傳人性神經纖維，與宿主神經元建立傳入性突觸聯系(aferent connectivity)。今后干細胞移植治療癲癇的實驗，應改在以上5個方面證明移植的干細胞是否整合到宿主神經環路中。

　　4．癲癇微環境(epileptic microenvironment)：Gage等 研究表明，從成年海馬獲得的干細胞移植到成年大鼠嗅球附近時，可分化為表達酪氨酸羥化酶的神經元，正常情況下只有嗅球能夠產生這種神經元，海馬不產生這類神經元。將相同的神經干細胞移植到海馬后，干細胞可分化為典型的海馬錐體神經元。移植的神經干細胞在白質大多發育為星形膠質細胞，而在灰質大多發育為神經元，以上研究表明神經干細胞所處的局部環境決定干細胞最終發育的結果。顳葉癲癇患者海馬內不僅有神經元的缺失，還存在大量的異常放電的“癲癇神經元”_l 。癲癇灶外遠隔部位神經元的正常生理活動在擴散中轉變成癇性活動，成為鏡影癲癇灶，這一現象被許多研究所報道。神經元在“癲癇環境”下的可塑性成為目前研究的焦點，同樣神經干細胞在癲癇微環境下也有轉變為“癲癇神經元”的可能。

　　神經干細胞發育具有區域特異性，在給干細胞移植治療癲癇帶來希望的同時，也帶來了挑戰。在癲癇患者的海馬內移植的神經干細胞是被誘導分化為丟失的神經元并起到治療癲癇的作用，還是被誘導發育為異常放電的“癲癇神經元”而加重癲癇發作 ?目前尚不能定論，這成為今后干細胞移植治療癲癇亟待解決的重要問題。

　　5．基因治療載體：Thompson 和Huber等的研究表明將谷氨酸脫羧酶(glutamic acid decarboxylase，GAD)、腺苷等基因片段導入到條件永生化細胞中，使其在移植部位進行表達，可達到抑制癲癇發作的目的。條件永生化細胞有導致細胞癌變的可能。神經干細胞作為基因治療載體具有其它載體所沒有的優點：①可攜帶多個外源基因；②能整合于宿主組織，外源基因表達穩定，維持時間長；③有遷移能力，能遠距離遷移到病變部位；④ 有修復功能，能分化為成熟細胞修復病損組織；⑤ 自身干細胞移植，避免產生免疫排斥反應。

　　膠質瘤、脊髓損傷等大量實驗已經證明神經干細胞是基因治療神經系統疾病的理想載體 。利用基因工程技術，將GAD(GABA合成酶)、腺苷等治療基因導入神經干細胞中，使其在移植部位進行表達，進而達到治療癲癇的目的是干細胞移植治療癲癇的一個重要發展方向 。

　　盡管干細胞移植治療顳葉癲癇有許多重大問題亟待解決，但隨著人們對顳葉癲癇發病機制和神經干細胞認識的不斷深入，干細胞移植治療顳葉癲癇有望成為一種嶄新的治療手段。